赖荣德 梁子敬
【关键词】肺损伤，急性；血浆；支气管肺泡灌洗液；尾加压素Ⅱ
尾加压素Ⅱ(UⅡ)是从硬骨鱼中发现的生长抑素样肽类物质，从低等生物到哺乳动物均存在，分布广泛，作用多而复杂。本研究就其在急性肺损伤(ALI)中的水平及作用探讨如下。
1 材料和方法
1．1 材料：28只SPF级SD大鼠，雌雄各半，体重(205±15)g，购自广州中医药大学实验动物研究中心；油酸(天津大茂化学制剂厂)；UⅡ放射免疫检测试剂盒(Phoenix公司)；质量分数为1%的乙二胺四乙酸(EDTA，康肽生物科技北京有限公司)，抑肽酶(Mbchem公司)，质量分数为3%的戊巴比妥钠，肝素钠（50 kU/L）；台式高速冷冻离心机(型号UNICERSAL32R，Hettich公司)，血气分析仪(型号CIBA.CORNING248，Bayer公司)，80 ℃冰箱(型号ELT1385，Harris公司)。
1．2 分组：将28只大鼠按随机数字表法分为4组，每组7只。随机选取一组作为生理盐水正常对照组，编为0组；另3组以油酸复制ALI动物模型，分别对应3、12和24 h 3个时间段各一组，并分别编为1、2、3组。
1．3 方法：0组自尾静脉注射灭菌生理盐水01 ml/kg，1~3组分别注射油酸01 ml/kg。自给药开始计时，3 h后，用肝素钠50 kU/L润滑过的1 ml注射器抽尾动脉血02~03 ml进行血气分析。0组和1组抽动脉血后，用3%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉，麻醉成功后取心脏血各2 ml，2组和3组也分别于12 h和24 h取等量心脏血，分别注入含1% EDTA 200 μl、抑肽酶100 μl(1 000 U)的试管中，然后活杀并取肺，右肺用生理盐水2 ml行支气管肺泡灌洗2次，取回收的支气管肺泡灌洗液(BALF)2 ml注入含以上抗凝剂的试管待处理。取2 ml血液，4 ℃下离心(3 000 r/min)15 min，血浆置1.5 ml小离心管中，置于80 ℃冻存待测。BALF处理同血液。UⅡ检测按试剂盒说明书进行。
1.4 统计学方法：采用SPSS 12.0统计软件进行处理。数据以均数±标准差(x±s)表示，采用独立两样本均数比较t检验，Ｐ<０.０５为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 临床表现：0组大鼠注射生理盐水后呼吸、活动等如常；活杀后见肺粉红、表面光滑，挤压肺脏后气道有少量白色泡沫样液体溢出。1~3组大鼠注射油酸后逐渐出现发绀，以尾部及四足明显，呼吸加深、加快，活动减少、不合群或蜷缩于笼子一角，1~2 h最明显，持续至12 h后略有减轻，24 h活动仍较正常大鼠少，尾部仍可见发绀，部分大鼠出现肉眼血尿；活杀后见肺明显充血肿胀、瘀斑，表面有较多渗出液，不挤压肺脏即可见气道大量粉红色泡沫样液体溢出。
2．2 血气分析(表1)：1~3组大鼠PaO２较0组均显著下降(Ｐ均<001)。
2．3 UⅡ浓度(表1)：1~3组血浆UⅡ浓度较0组进行性升高，BALF中UⅡ浓度进行性降低，差异均有显著性。
3 讨论
采用油酸型ALI模型是因为它已有的可靠性在探讨早期有效的ALI防治方法或措施中得到广泛应用〔１〕。已有研究显示，血管活性物质如内皮素、血管紧张素等对ALI的发生、发展有明显影响。UⅡ是一种生长抑素样环肽〔2〕。研究发现其具有强烈的缩血管作用〔3〕，是目前已知的缩血管物质内皮素1的4倍以上〔4〕；但也有研究认为其对肺小血管(尤其是肺小动脉)呈现强烈的扩张作用〔5〕，并参与血管平滑肌增殖、重构以及气道的收缩、增殖、重构等〔68〕。最近研究证明，UⅡ能够提高血管通透性〔9〕，促进气道血浆渗出〔10〕，促使内皮细胞通透性增加〔11〕，提示UⅡ可能参与渗出性疾病的发病过程。
ALI其本质是由于多种细胞和炎性介质参与，导致毛细血管通透性增加，渗出增多，透明膜形成，肺泡塌陷，通气/血流比例失调，肺间质性和肺泡性肺水肿，X线胸片示肺部对称性浸润阴影，最终产生进行性低氧血症和呼吸窘迫，在此过程中UⅡ可能会起促进作用。
我们的研究显示，ALI大鼠血浆中UⅡ水平升高，且随病程延长，浓度呈进行性增高，提示UⅡ可能参与ALI的发病过程。然而，ALI大鼠BALF中UⅡ浓度是呈进行性降低的，推测肺泡上皮细胞参与UⅡ的合成和(或)分泌即由于肺泡上皮的损伤，导致其合成或分泌减少，最终引起BALF中UⅡ浓度降低。同理，血浆中UⅡ呈进行性增高，表明可能有肺脏之外的其他组织、细胞参与了UⅡ的合成和分泌。由此可进一步证实，ALI是全身性疾病，或是全身性疾病的一部分，即肺外组织、器官参与ALI的发病。“低氧可刺激大鼠UⅡ合成和分泌增多，UⅡ可能不仅是局部激素，也可能是全身激素”结论相吻合〔１２〕。提示我们在治疗ALI时，更应考虑从全身的角度着手处理。本研究注重疾病的早期阶段，并未观察疾病全过程，所以有其局限性，对UⅡ与ALI的关系，尤其ALI发病机制的研究有待进一步完善。
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基金项目：广东省广州市教育局基金资助项目（1053）
作者单位：510120广州医学院第一附属医院急诊科
作者简介：赖荣德，男，主治医师，医学硕士(Email:lairongde@sina.com)。 |
